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DNA提取技術服務到底是怎么樣的呢？
發(fā)布時間： 2022-11-29 點擊次數： 1519次DNA提取技術服務是一種使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母細胞壁，然后采用一種新型的酵母質粒純化柱實現從酵母細胞中進行小量質粒快速抽提的試劑盒。DNA提取技術服務本實驗方法的基本原理是，在高鹽狀態(tài)下，硅膠膜專一性地吸附DNA；而在低鹽或水溶液狀態(tài)下，DNA被洗脫下來。此法簡便快捷，可在30分鐘內同時提純二十多個樣品。從3～5ml培養(yǎng)過夜的含高拷貝質粒的菌液中可以獲得10～20μg高純度的質粒DNA，用于酶切、轉化、DNA自動測序和手工測序等。DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、堿裂解法。生物方式:酶法。根據核酸分離純化方式的不同有硅質材料、陰離子交換樹脂等。DNA提取方法：1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速離心后取上清，所得DNA大小為100-150kb2、甲酰胺解聚法:破碎細胞同上，然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。3、玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪于乙醇上，然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。4、異丙醇沉淀法:基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態(tài))5、表面活性劑快速制備法:用TritonX-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。6、加熱法快速制備:加熱96℃-100℃，五分鐘，然后離心后取上清，可用于PCR反應。7、堿變性快速制備:先用NaOH作用20分鐘，再加HCI中和，離心后取上清，含少量DNA。
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